小鼠海馬神經元細胞HT22

　　一、細胞介紹：

　　HT-22永生化細胞系是由HT-4亞克隆而來，對谷氨酸高度敏感，因此常用來做為谷氨酸誘導的神經毒性的研究模型。

　　二、細胞特性：

　　1）來源：小鼠，腦

　　2）形態(tài)：神經元細胞貼壁生長

　　3）含量：>1x106細胞數

　　4）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

　　5)用途：僅供科研使用。

　　三、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

　　1）準備DMEM（推薦iCell-0001）培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清，10%；雙抗，1%。

　　2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

　　3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

　　四、對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

　　1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

　　2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來終止消化。

　　3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

　　3）細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

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