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小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞HT22

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小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞HT22

  一、細(xì)胞介紹:

  HT-22永生化細(xì)胞系是由HT-4亞克隆而來,對谷氨酸高度敏感,因此常用來做為谷氨酸誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性的研究模型。

  二、細(xì)胞特性:

  1)來源:小鼠,腦

  2)形態(tài):神經(jīng)元細(xì)胞貼壁生長

  3)含量:>1x106細(xì)胞數(shù)

  4)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

  5)用途:僅供科研使用。

  三、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

  1)準(zhǔn)備DMEM(推薦iCell-0001)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

  2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

  3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

  四、對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:

  1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

  2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來終止消化。

  3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

  3)細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

  http://www.syongsci.com/Products-36494016.html

  https://www.chem17.com/st484218/product_36494016.html


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